Liebe Stacking Gemeinde,

heute traue ich mich mal einen stack von mir hochzuladen und bitte um technische und ästethische Kritik.
Links der stack direkt aus den Nikon RAW Bildern, rechts der stack mit TopazDeNoise entrauschten DNG Bildern (N50S30R0C0).

Technische Daten:
- Pollen Hibiscus trionum, ca. 150-160 Mikrometer Durchmesser
- Nikon D850, 1/250s, ISO64, Nikon Blitz 1/2 -0,3EV (ETTR)
- Zeiss Plan Apo 20x, Auflicht am Mikroskop, offene Aperturblende
- Stackingabstand 0,5 Mikrometer, 240 Aufnahmen
- Helicon Focus, C, Standardeinstellungen
- Capture One 22: Nur Bildausschnitt und Tonwertanpassung in den Tiefen

Keine weiteren Anpassungen, kein Photoshop - das soll später erst geschehen.

Wahrscheinlich zuviele Aufnahmen und zu kleiner Stackingabstand - da wollte ich auf Nummer sicher gehen.
Der Pollen ist in der Aufsicht zwar eine Halbkugel, aber die Stacheln der unteren Halbkugel sind auch bildrelevant - da bin ich mir nicht sicher ob ich nicht einen Teil des unteren stacks weglassen soll. Der Pollen wirkt am Rand aufgeblasen.

Über Eure Diskussionsbeiträge und Kritik würde ich mich freuen.
Ich werde mich noch einige Zeit mit Pollen beschäftigen.
Fluoreszenzaufnahmen habe ich auch schon gemacht, die eignen sich aber eher als Weihnachtsgruss.

Beste Grüße
Christian

Vielen Dank lieber Kurt und Heike für Eure höfliche Kritik.
Das 20x Objektiv hat eine Apertur von 0,6. Das gibt bei dem Pollen noch eine schöne Tiefenschärfe.
Das 50x Objektiv hat eine Apertur von 0,8 - merklich weniger Tiefenschärfe - das werde ich als nächstes testen.
Diffuse Beleuchtung am Mikroskop mit normalen Auflichtobjektiven (keine LD) - da muss man basteln, aber ich habe da einige Ideen.

Vielleicht eignet sich das Setup aber mehr für Autofluoreszenz Aufnahmen.
Habe ich meiner Antwort beigefügt - das ist exakt der gleiche Pollen - nicht geblitzt - Belichtungszeiten zwischen 1,3s - 30s.

Lieber Kurt,
ja, 365nm Licht ist schon ein Hammer.
Danke für Bildbearbeitung!
Du hattest übrigens Recht was das 50x 0,8 betrifft - bin gerade dabei.
Glaube aber, das jetzt Verwacklungsunschärfe reinkommt.
Und ich frage mich, ob ich nicht auf 0,333 Mikrometer Schrittweite runter gehen sollte.
Wird bald gepostet.
Beste Grüße
Christian

Lieber Kurt,
ich habe heute Epi-DF 50x 0.8 versucht.
Das Dunkelfeld war etwas komisch (ungleichmäßig) - vielleicht war der Objektträger geneigt.
Ist Dir das schon mal untergekommen? Vielleicht ein anderer Grund? Objektiv kaputt?
Ich poste das Bild dennoch, weil es schön zeigt, was noch aus dem Pollen rauszuholen ist mit Weißlicht.
Die linke untere Hälfte gefällt mir sehr gut - werde das die Tage noch einmal versuchen.
Beste Grüße
Christian
P.S.: Um die stacking Artefakte kümmere ich mich später - zunächst will ich testen was man optisch rausholen kann. Jeder Tipp ist willkommen.

Epi-Fluoreszenz 365nm hat mit dem 50x 0.8 nicht funktioniert - zuviel Streulicht.

Herzlichen Dank, Kurt!
Du hast mir gezeigt, das es sich lohnt in diese Aufnahme noch etwas Arbeit zu investieren.
Ich denke, ich werde dann auch Retusche (am Pollenrand) machen.
Lohnt sich ADCSee wenn man Photoshop, CaptureOne und die Topaz Produkte hat?
Momentan kämpfe ich noch mit dem Streulicht - morgen versuche ich mal andere Stellungen von Leuchtfeld- und Aperturblenden.
Beste Grüße
Christian

Auch das NASA Rechenzentrum hilft bei TopazDeNoise nicht.
Habe es mal auf einem Gaming Rechner laufen lassen - viel RAM, sehr schnelle Grafikkarte.
War unwesentlich schneller als mein PowerBookPro.
Die müssten mal Multithreading und GPU Nutzung ergänzen.

Sagt mal, mit welchen Einstellungen nutzt Ihr denn TopazDeNoise VOR dem stacken?
Ich habe bisher die Standardeinstellungen N50S30R0C0 genutzt.
Jetzt läuft gerade ein Stack durch N80S50N20C20.
Mal schauen was Helcon Focus dann daraus macht.

Sagt mal, Heike und Kurt.
Soll ich Euch mal ein paar Hibiscus Pollen zusenden?
Würde mich interessieren wie Ihr da rangeht.

Die Performance der diversen Topaz Programme ist garnicht mal so sehr von der grundsätzlichen Power des Rechners abhängig, sondern auch vom Typ der Grafikkarte.
So meine Erfahrung nach Kontaktaufnahme zum Topaz Support, nachdem SharpenAI gefühlt Tage brauchte.
Andere Grafikkarte, der selbe Rechner, nun läuft's deutlich besser.