Hallo hier mein erstes posting (nach der Vorstellung), und gleich viele Fragen.

Das nachstehende Bild wurde aufgenommen mit einem Zeiss Phomi Mikroskop mit nur Auflicht mit
2 Jansjö-Lämpchen von dem bekannten skandinavischen Möbelhaus. Die beiden LED Lämpchen
sind mit einer weissen milchigen Folie bedeckt (ausgeschnitten aus einer Plastiktragetasche vom
Lebensmittelhandel).
Der Setup ist folgender. Die Objekte liegen auf einem Objektträger, auf den ein dunkler Klebestreifen
mit der klebenden Fläche nach oben, aufgebracht ist. Durchlicht ist ausgeschaltet.
Meine Kamera, eine Canon 60D, ist über den Photoausgang des Mikroskops adaptiert. In dem Adapter befindet sich
ein Mikroskopokular (Zeiss Brille 10X). Auf der Kamera befindet sich das Objektiv Pentax-M 1:2,8 40mm,
das über einen Zwischenring im Filtergewinde am Adapter montiert ist.
Die Bilder sind aufgenommen mit einer Verschlusszeit von 1,6Sek bei voll geöffneter Blende und ISO 100, und werden
als .jpg Datei gespeichert.
Ausgelöst wird die Kamera über das Canon Liveview Programm.
Die Fokusveränderung wird manuell am Mikroskop vorgenommen in kleinen Schritten. Die Veränderung
des Fokusbereiches kann im Liveview-Bild auf dem PC beobachtet werden.
Gestackt wird mit Picolay, bearbeitet mit Photoshop-Elements V14.
Hier ein Bild, das so erstellt wurde.



Mit der Schärfe der Bilder bin ich überhaupt nicht zufrieden. Weiß aber nicht so recht wo ich ansetzen muß!
1. Liegt es an der Schrittgröße beim Stacking (Anzahl der Bilder pro Schärfentiefebereich)?
2. Liegt es an der Kameraadaption?
3. Liegt es an der Kamera selbst (Spiegelschlag, mechanische Auslösung die Verwacklung verursacht)?
4. Liegt es an der Mikroskop Optik?
5. Liegt es an der Bildbearbeitung?

Könnt ihr mir Tips geben, wo ich anfange zu suchen und wie ich die Qualität der Bilder verbessern kann.

Sorry für die vielen Fragen, und vielen Dank

Klaus

Hallo Klaus,
Ich arbeite auch mit der 60d. Im Liveview hast du keine Probleme mit dem Spiegelschlag, auch Verschlüsse stören nicht, schon gar nicht bei der Verschlusszeit.
Was mich irritiert ist das 40mm Objektiv im Strahlengang. Soll das als Relaislinse dienen? Ich würde dir raten ohne diesem Objektiv und nur mit "Luft" (=leerer Tubus) die Kamera
an das Mikroskop anschließen. Welches Mikroskopobjektiv hast du verwendet?
Ich könnte mir vorstellen das die Kombination (Mikroskopobjektiv+Okular+Objektiv) nicht für deine Ansprüche genügend ist. Ich würde es mit weniger Glas versuchen.
(Ein Bild vom Aufbau könnte helfen)
Gruß Sebastian

:D :D :D
Ich stimme dir in allen Punkten zu Heike.
:D

Hallo,
danke für die vielen Infos.

Mein Mikroskop ist ein Phomi III von Zeiss, ein endlich System mit einer
Abgleichlänge von 160.
Das Mikroskopobjektiv war ein einfaches Zeiss Plan 6,3/0,16 160/-.

Die Nachbearbeitungsschritte waren: Tonkorrektur (Auto), Dunstentfernung (Auto), Schärfe erhöhen

Ich werde mal versuchen die Kamera direkt auf den Tubus aufzusetzen, ohne Okular und ohne
Kameraobjektiv.

Melde mich dann wieder.

Danke nochmal
LG Klaus

Hallo Heike,

meine Belichtungszeiten sind immer in der von Dir zu vermeidenden Zone (mit EOS 650D), da wackelt nix. Außerdem fotografiere ich mit höchster Auflösung, aber nicht in RAW. Das kann also nicht der Grund für schlechtere Aufnahmen sein. Natürlich fotografiere ich NUR durch das Objektiv des Mikroskops - ich denke, es liegt hauptsächlich an den Zwischenoptiken und den Stackingschritten, die das Bild verschlimmbessern.

Hallo,
ich habe einige Versuche gemacht.

1. Ohne Okular geht es gar nicht, die 10 fache Vergrößerung des Okulars kann ich nicht durch
den Einsatz eines anderen Mikroskopobjektives kompensieren, z.B. 40 oder 63 fach. Der Arbeitsabstand
den ich zwischen Objektiv und Objekt benötige ist einfach zu klein, außerdem erfordern die Zeiss Objektive
mit hoher Vergrößerung den Einsatz eines Deckglases, was bei diesen relativ dicken Objekten nicht geht.
Beim probieren habe ich mir ein Objekt mit der Linse des Objektives zerdrückt. Macht aber nichts!!!

2. Ich habe das Objektiv an der Canon entfernt. Das geht gut, allerdings hat es keine Verbesserung der
Ergebnisse gebracht. Außerdem habe ich den ISO Wert auf 1000 gestellt, und kann jetzt mit 1/10 SEk belichten.

3. Ich habe die Anzahl der Aufnahmen um fast das 8 fache erhöht, von ca. 30 auf 240. Leider hat dies auch keine
Verbesserung des Ergebnisses gebracht, (Zumindest für mich nicht feststellbar).

Ich habe auch RAW Aufnahmen gemacht allerdings habe ich damit noch keinerlei Erfahrung, muß erst noch herausfinden,
wie ich 240 RAW Aufnahmen einigermaßen effizient in TIFF's umwandeln kann, um diese anschließend zu stacken.

@Cai-Uso, ich vermute du machst deine Aufnahmen durch das Mikroskopokular, das im Fotoadapter eingebaut ist.

Im Augenblick bin ich etwas ratlos, vielleicht muß ich das Ganze mal an einem anderen Mikroskop versuchen. Es gibt
an meinem Mikroskop noch so eine Zwischenoptik, das Optovar, das direkt hinter dem Mikroskopobjektiv sitzt und vor allen
Dingen genutzt wird um die Phasenringe bei Phasenkontrastaufnahmen einzustellen. Das könnte der Bösewicht sein,
allerdings trau ich mich nicht hier anzufangen zu montieren.

LG
Klaus

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Zitat von KlausB im Beitrag #12

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Ich habe auch RAW Aufnahmen gemacht allerdings habe ich damit noch keinerlei Erfahrung, muß erst noch herausfinden,
wie ich 240 RAW Aufnahmen einigermaßen effizient in TIFF's umwandeln kann, um diese anschließend zu stacken.

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Hallo Klaus,

ich habe die EOS 650D mit einem linsenlosen Adapter am Mikroskop. Ich fotografieren nur durch das Mikroskopobjektiv - geht wunderbar.
Meine vier Objektive sind auch ohne Deckglas gerechten: 3,6x; 6,3x; 10x; 20x.
Allerdings sind meine Objekte auch nicht so ausladend wie diese Schnecken - aber mit 3,6x sollte es ohne jegliche Zwischenoptik funktionieren.

Hallo Klaus,
Machst du mir bzw uns mal bitte nen Foto von der kompletten Fotoadaption ?
Ich nutze Universal - und das nach ähnlichen Problemen im Anfang
Nicht aufeinander abgestimmtes Glas und Abstände sind kritisch
Desweiteren: das PhoMi (III) hat deutlich mehr Strahlengang als die Universale - bedingt durch die integrierte Kamera
Ich selbst nutze im Auflicht EPI Optiken
Fehlende Deckglaskorrektur ist bis zu einer NA von ca 0,10 unkritisch
Gruß
Sven